湖南省永州市雞感染 H7N9 流感病毒變異株的調查

禽流感（Avian influenza，AI）是由流感病毒引起的禽類感染或疾病綜合征。流感病毒屬于RNA 病毒的正黏病毒科，其最顯著的生物學特性是亞型眾多、變異頻繁。其分子機制涉及點突變引起的抗原漂移（Antigenic drift）和不同亞型毒株同源重組產生新亞型所引起的抗原轉變（Antigenicshift）[1]。流感病毒根據兩個蛋白抗原性的不同，可被分為 16 個 HA 亞型（H1~H16） 和 9 個 NA亞型（N1~N9），理論上流感病毒可組成 144 個亞型 [2]。高致病性禽流感病毒目前僅見于 H5、H7兩個亞型。它們從水禽傳給陸禽，經過幾代傳播以后，從低致病性演變成高致病性病毒。關于 H7N9流感病毒變異株分子特征、人感染后的臨床癥狀已有報道 [3]，但未見禽感染 H7N9 流感病毒變異株臨床特征的報道。因此，研究禽感染 H7N9 流感病毒變異株的臨床特征及變異株的來源，對重大動物疫病防控是有意義的。

1　材料與方法

1.1 病例來源

發病雞來自湖南省永州市東安縣端橋鋪鎮某一起雞感染 H7N9 流感病毒變異株的調查養禽場。該禽場存欄蛋雞 6 000 余羽，品種為海蘭灰，320 日齡。至發病第 4 日，累計死亡 102 羽。分別隨機采集 8 只發病雞的咽 / 肛拭子及血液樣品，備用。

1.2　流行病學調查

向養殖戶、飼養員、防疫技術員詢問關于雞發病的相關信息，并對飼料、用藥進行取證調查。

1.3　病理解剖

隨機選擇 8 只發病雞進行臨床解剖，對發病雞的氣管、心臟、肝臟、腎臟等器官進行病理解剖并拍照，做好記錄。

1.4　實驗室檢測

1.4.1　檢測試劑。禽流感病毒 H5（Re-6 株）、H7 亞型血凝抑制試驗抗原（哈爾濱維科生物技術開發公司出品，批號 201605）；禽流感病毒 H5/H7/H9 型實時熒光 RT-PCR 檢測試劑盒（深圳生科源生物科技有限公司產品，批號 201506）。

1.4.2　檢測方法。關于禽流感病原學檢測，按禽流感病毒熒光 RT-PCR 檢測方法（GB/T 19438.1—2004）。從樣品中提取病毒 RNA 后，以實時熒光定量反轉錄 - 聚合酶鏈反應法（real-time RT-PCR）檢測 H5/H7/H9 亞型核酸。關于禽流感抗體檢測，按高致病性禽流感診斷技術（GB/T 18936—2003）進行血凝和血凝抑制試驗，并記錄相關數據。

1.4.3　數據處理。將有關數據錄入 Excel 2003軟件，通過 SPSS 13. 0 軟件進行統計分析，使用GraphPad Prism 5 軟件制圖。

2　結果與分析

2.1　流行病調查結果

發病前 100 d，養雞場實施過 H5 亞型流感疫苗和“H5+H9”聯苗（廣東永順）免疫，飼養狀況良好，并無其他烈性發病情況。發病后的前 4 天，分別死亡 10、18、31、102 羽（圖 1）；死亡的前幾天，病雞采食量、產蛋量無明顯變化，外觀正常；至瀕死日，呈現明顯的外觀癥狀：精神萎靡、頭部腫大、肉髯發紺、流淚、口流涎（圖 2），也有部分雞在采食過程中突然死亡。由于雞發病迅猛，死亡快，無腳趾出血癥狀。

圖 1　發病禽場日死亡數量

首頁前一頁123后一頁尾頁